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怎樣設(shè)定ELISA實驗中的空白對照?

用稀釋液代替檢測樣本、用以觀測終反應(yīng)的顯色“本底”、并用于酶標儀消除、扣除“本底”,即:以本底為“零”讀取陽性、陰性對照孔和樣本檢測孔的吸光值(A);或者,在計算陰性對照均值(NCx)、陽性對照均值(PCx)、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時減去空白對照的本底吸光值。


陰性對照


    應(yīng)當是本項檢測試驗中采用與待撿物具有同源性和同質(zhì)性,又不含有待檢物質(zhì),并能客觀比較和鑒別處理因素(血清免疫學(xué)試驗中有特異性抗原與抗體反應(yīng))之間的差異?!£幮詫φ盏幕窘M成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致,好先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如,檢測人血清標本時,陰性    


陽性對照同陰性對照


只是采用“精選”的含有待檢物質(zhì)的人血清制備而成。所謂“精選”,就是把收集的陽性人血清經(jīng)過數(shù)種試驗進行“篩試”、把含有“干擾性物質(zhì)”的血清剔除、不用,以避免出現(xiàn)“假陽性”干擾試驗結(jié)果。   


陽性對照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致,一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì),加入一定量的待檢物質(zhì)。比如,以人血清為標本的測定,陽性對照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標準品。


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