糖化血紅蛋白檢測方法

糖化血紅蛋白檢測方法很多，常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等

離子交換層析是指分手工和儀器兩種。手工微柱有Bio-Rad和西班牙BIO SYSYEMS等多家公司產(chǎn)品，手工微柱操作受到人工因互影響，可能會洗脫不完全或過度洗脫，并受外界環(huán)境溫度的影響，而某些紅蛋白如HbF異常增加時(shí)，也會與糖化血紅蛋白同時(shí)洗脫肉而使結(jié)果產(chǎn)生偏差。相應(yīng)的儀器以英國DrewSCIENTIFIC公司DS5糖化血紅蛋白儀為例(Bio-Rad公司DIASAT亦為同一產(chǎn)品)，采用微柱法離子交換層析和梯度洗脫胎技術(shù)可分離血紅蛋白的變異體與亞型，除可測定糖化血紅蛋白外，還可同時(shí)檢測出HbS與HbC的存在與否，在計(jì)算糖化血紅蛋白值時(shí)扣除變異體產(chǎn)生和影響，從而使結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠，CV值小于2。同時(shí)該儀器配有專門的稀釋溶血器，可直接進(jìn)行全血操作，5分鐘即可報(bào)告結(jié)果，并儲存樣品的檢測結(jié)果，層析柱價(jià)格也較為低廉。適合于較多標(biāo)本的檢測。更大型的儀器有Drew SCIENTIFIC公司的Hb-Gold，除可測定糖化血紅蛋白外，還可分離檢測血紅蛋白的600多種子變異體和亞型，用于地中海貧血等疾病的診斷。

親和層析是指目前糖化血紅蛋白檢測的新方法，該方法特異性強(qiáng)，不受異常血畿蛋白的干擾。英國DREWSCIENTIFIC公司的DS1糖化血紅蛋白分析儀日前剛剛獲得美國儀器藥品管理署(FDA)的認(rèn)可獲準(zhǔn)上市，作為目前世界的快速床邊糖化血紅蛋白儀，它彩硼酸親和層析法，只需10ul全血即可在4分鐘內(nèi)快速分離檢測糖果化血紅蛋白，為臨床提供即時(shí)的化驗(yàn)結(jié)果，從而使醫(yī)生在患者就診的時(shí)間明確診斷并制定相應(yīng)的治療方案，特別適合于臨床科室使用，尤其對小兒患者而言更有優(yōu)勢。其檢測結(jié)果也完全達(dá)到并超過臨床要求，CV值5以內(nèi)。

高壓液相方法是指可全分離測定糖化血紅蛋白及血蛋白的變異體和亞型，優(yōu)點(diǎn)是檢測速度快，精度高，CV值小于1。是目前世界上公認(rèn)的糖化血紅蛋白檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。儀器保養(yǎng)簡單，價(jià)格相對低廉，操縱性能強(qiáng)。附：Tosoh公司是參加美國DCCT實(shí)驗(yàn)的原始機(jī)構(gòu)之一，在糖化血紅蛋白領(lǐng)域具有一定權(quán)威性。

免疫凝集法的原理是糖化血紅蛋白與相應(yīng)的單抗結(jié)合進(jìn)而發(fā)生凝集反應(yīng)，通過測定吸光度來表示凝集量，可用于全生化分析儀上進(jìn)行測定。專用的儀器也有Bayer的DCA-Vantage，要求對樣品成批試驗(yàn)。每次試驗(yàn)均應(yīng)使用一個(gè)新試劑盒，操作前應(yīng)注意混勻試劑。指出的是免疫凝集法測定糖化血紅蛋白，度較差，CV值一般大小6。