糖化血紅蛋白檢測(cè)方法

糖化血紅蛋白檢測(cè)方法很多，常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等

離子交換層析是指分手工和儀器兩種。手工微柱有Bio-Rad和西班牙BIO SYSYEMS等多家公司產(chǎn)品，手工微柱操作受到人工因互影響，可能會(huì)洗脫不完全或過(guò)度洗脫，并受外界環(huán)境溫度的影響，而某些紅蛋白如HbF異常增加時(shí)，也會(huì)與糖化血紅蛋白同時(shí)洗脫肉而使結(jié)果產(chǎn)生偏差。相應(yīng)的儀器以英國(guó)DrewSCIENTIFIC公司DS5糖化血紅蛋白儀為例(Bio-Rad公司DIASAT亦為同一產(chǎn)品)，采用微柱法離子交換層析和梯度洗脫胎技術(shù)可分離血紅蛋白的變異體與亞型，除可測(cè)定糖化血紅蛋白外，還可同時(shí)檢測(cè)出HbS與HbC的存在與否，在計(jì)算糖化血紅蛋白值時(shí)扣除變異體產(chǎn)生和影響，從而使結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠，CV值小于2。同時(shí)該儀器配有專(zhuān)門(mén)的稀釋溶血器，可直接進(jìn)行全血操作，5分鐘即可報(bào)告結(jié)果，并儲(chǔ)存樣品的檢測(cè)結(jié)果，層析柱價(jià)格也較為低廉。適合于較多標(biāo)本的檢測(cè)。更大型的儀器有Drew SCIENTIFIC公司的Hb-Gold，除可測(cè)定糖化血紅蛋白外，還可分離檢測(cè)血紅蛋白的600多種子變異體和亞型，用于地中海貧血等疾病的診斷。

親和層析是指目前糖化血紅蛋白檢測(cè)的新方法，該方法特異性強(qiáng)，不受異常血畿蛋白的干擾。英國(guó)DREWSCIENTIFIC公司的DS1糖化血紅蛋白分析儀日前剛剛獲得美國(guó)儀器藥品管理署(FDA)的認(rèn)可獲準(zhǔn)上市，作為目前世界的快速床邊糖化血紅蛋白儀，它彩硼酸親和層析法，只需10ul全血即可在4分鐘內(nèi)快速分離檢測(cè)糖果化血紅蛋白，為臨床提供即時(shí)的化驗(yàn)結(jié)果，從而使醫(yī)生在患者就診的時(shí)間明確診斷并制定相應(yīng)的治療方案，特別適合于臨床科室使用，尤其對(duì)小兒患者而言更有優(yōu)勢(shì)。其檢測(cè)結(jié)果也完全達(dá)到并超過(guò)臨床要求，CV值5以?xún)?nèi)。

高壓液相方法是指可全分離測(cè)定糖化血紅蛋白及血蛋白的變異體和亞型，優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)速度快，精度高，CV值小于1。是目前世界上公認(rèn)的糖化血紅蛋白檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。儀器保養(yǎng)簡(jiǎn)單，價(jià)格相對(duì)低廉，操縱性能強(qiáng)。附：Tosoh公司是參加美國(guó)DCCT實(shí)驗(yàn)的原始機(jī)構(gòu)之一，在糖化血紅蛋白領(lǐng)域具有一定權(quán)威性。

免疫凝集法的原理是糖化血紅蛋白與相應(yīng)的單抗結(jié)合進(jìn)而發(fā)生凝集反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)表示凝集量，可用于全生化分析儀上進(jìn)行測(cè)定。專(zhuān)用的儀器也有Bayer的DCA-Vantage，要求對(duì)樣品成批試驗(yàn)。每次試驗(yàn)均應(yīng)使用一個(gè)新試劑盒，操作前應(yīng)注意混勻試劑。指出的是免疫凝集法測(cè)定糖化血紅蛋白，度較差，CV值一般大小6。